肝素如何提取制作的？

肝素如何提取制作的？

一、酶解-树脂法酶解

取100kg新鲜肠黏膜(总固体5%-7%)，加苯酚200ml

(0.2%)，如气温低时可不加。在搅拌下加入绞碎胰0.5-1kg(0.5%-1%)。

用

300-400g/L(30%-40%)NaOH溶液调节pH8.5-9，升温至40-45℃，保温2-3h。pH8,再加5kg粗食盐(5%)升温至90℃左右,用6mol/L

HCl调节pH 6.5左右,停止搅拌,保温20min,以布袋过滤,得酶解滤液。

二、盐解-树脂法

提取

取新鲜猪肠黏膜投入反应锅中，按30g/L(3%)加入氯化钠，NaOH调节pH9，逐步升温至50-55℃。保温2h，继续升温至95℃，维持10min，冷却50℃以下，用30目双层纱布过滤,收集滤液。

猪肠粘膜[NaCl;；NaOH]→[pH9；50-55℃]滤液吸附、洗涤、洗脱、沉淀

取冷却50℃以下的滤液，加入714型(强碱性)Cl-型树脂(新树脂用量为2%),搅拌8h后静置过夜。

三、CTAB*提取法

(*十六烷基三甲基溴化胺为长链季铵盐)提取、络合

按猪肠黏膜液(V)：Na2SO4(m)：硫酸铝(m):CTAB(V)=1:0.15:0.04:0.001的配料比投料。

取新鲜猪小肠黏膜投入反应罐中，搅拌下加入硫酸钠，溶解后，用碱液调节pH11-11.5，升温50℃，保温搅拌2h。再加硫酸铝，溶解后，用氢氧化钠调节pH7.5-8，升温至95℃,保温10min。

扩展资料：

肝素的检测：

1、APTT

APTT依然是作为监测UFH的选择之一。它是非常简单，快速和便宜的项目。然而，却难以标准化。APTT检测需要整个凝血瀑布中的所有蛋白都是完整的，从而可以准确测量肝素水平。

2、硫酸鱼精蛋白中和试验

该试验是基于UFH，一个高度负电荷的分子，被硫酸鱼精蛋白，一个正电荷的蛋白，中和的原理。配备不同浓度的硫酸鱼精蛋白加入血浆中，再加入凝血酶，测量凝固时间。将凝血酶凝固时间恢复至正常的硫酸鱼精蛋白浓度就被认为是肝素的浓度。

3、抗Xa活性检测

发色底物法检测肝素抗Xa活性的原理都是一样的：标本中的肝素与AT形成复合物，抑制过量添加的Xa因子。剩余的Xa因子活性的测量，通过其与特异的底物作用，释放出pNA来进行。

参考资料来源：百度百科—肝素